2022年8月18日，國家衛(wèi)生健康委發(fā)布“關(guān)于《可用于食品的菌種名單》和《可用于嬰幼兒食品的菌種名單》更新的公告”，新增了片球菌屬（Pediococcus）的乳酸片球菌和戊糖片球菌，以及魏茨曼氏菌屬（Weissella）凝結(jié)魏茨曼氏菌。這兩類工業(yè)發(fā)酵菌在分類學(xué)上有所不同，片球菌屬屬于革蘭氏陽性球菌，而魏茨曼氏菌屬則屬于芽胞桿菌。近些年來，部分生產(chǎn)企業(yè)已經(jīng)開始將片球菌屬與魏茨曼氏菌屬應(yīng)用于食品生產(chǎn)。小編注意到已經(jīng)頒布的《2025年國家食品污染物和有害因素風(fēng)險監(jiān)測工作手冊》中也增加了片球菌屬和魏茨曼氏菌屬的檢驗，但是大多數(shù)同行還從未見過這兩個新菌屬在分離計數(shù)培養(yǎng)基上的生長狀態(tài)，現(xiàn)在小編就與大家分享一下。
一、片球菌屬
圖一 片球菌屬的檢驗程序（依據(jù)：《2025年國家食品污染和有害因素風(fēng)險監(jiān)控工作手冊》）
作為食品生產(chǎn)菌種，片球菌屬通常有兩種應(yīng)用方式，一是作為益生菌直接添加到食品中，另一種則是作為菌種制劑的原料。兩種應(yīng)用方式有所區(qū)別，在檢驗程序中樣品處理也有所區(qū)別，因此各位同行應(yīng)注意樣品的實際情況，根據(jù)不同的食品類型選擇不同的操作流程。
如果樣品中只添加片球菌屬或者添加的片球菌屬遠(yuǎn)高于其他微生物，使用MRS瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行計數(shù)即可；如果樣品含有片球菌屬和其他菌株，則需要使用改良MRS瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行計數(shù)。MRS培養(yǎng)基想必大家都很熟悉了，絕大部分乳酸菌都能很好的生長。在這里的改良MRS瓊脂培養(yǎng)基，是額外添加了三種附加試劑：半胱氨酸鹽酸鹽為還原劑，增強(qiáng)片球菌的抗氧化能力，使其在有氧條件下也能良好生長，新生霉素與萬古霉素則是可以抑制非片球菌的生長，有利于片球菌的計數(shù)。
下面是片球菌CICC 10344菌株分別傾注接種MRS培養(yǎng)基和改良MRS瓊脂培養(yǎng)基，36 ℃培養(yǎng)48 h的生長狀態(tài)。
圖五 MRS培養(yǎng)基，可配制成改良MRS瓊脂培養(yǎng)基
片球菌屬在MRS培養(yǎng)基上的形態(tài)與大多數(shù)乳酸菌相同，并且在MRS培養(yǎng)基上與改良MRS瓊脂培養(yǎng)基上形態(tài)也沒有明顯區(qū)別，均為灰白色菌落，厭氧培養(yǎng)菌落會比有氧培養(yǎng)稍大。
二、魏茨曼氏菌屬
圖六 魏茨曼氏菌屬的檢驗程序（依據(jù)：《2025年國家食品污染和有害因素風(fēng)險監(jiān)控工作手冊》）
魏茨曼氏菌屬的檢驗流程與片球菌屬類似，也同樣需要區(qū)分樣品類型，但是這里多了一步傾注前熱激的步驟。根據(jù)相關(guān)資料，小編推測原因如下：一方面魏茨曼氏菌屬具有耐熱性，經(jīng)過80 ℃水浴10 min，可以殺死絕大部分非魏茨曼氏菌屬的微生物；另一方面，魏茨曼氏菌屬屬于中度嗜熱菌，適當(dāng)?shù)臒峒た纱龠M(jìn)菌體代謝和休眠的芽胞萌發(fā)，加速酶活性，使得干燥樣品中的魏茨曼氏菌屬恢復(fù)其活力（如果若樣品水分含量較高，則不必進(jìn)行水浴熱激）。
傾注使用的是魏茨曼氏菌屬計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（WCA），培養(yǎng)條件為需氧，40 ℃±2 ℃，48 h±2 h。下面是菌株CICC 24625傾注接種魏茨曼氏菌屬計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（WCA），40 ℃有氧培養(yǎng)48 h的生長狀態(tài)。
圖八 魏茨曼氏菌屬計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（WCA）
魏茨曼氏菌屬在WCA上的形態(tài)為乳白色小菌落，傾注后在瓊脂內(nèi)部生長的菌落不是梭狀，而是邊緣不規(guī)則的三角形。
以上就是關(guān)于片球菌屬和魏茨曼氏菌屬在各自計數(shù)培養(yǎng)基上的形態(tài)介紹，希望看過本文后，各位同行對片球菌屬與魏茨曼氏菌屬有了一個初步認(rèn)識，今后小編也會繼續(xù)跟大家分享微生物檢驗的各種知識，最后祝大家工作順利。